致力于液氮罐容器
经济实用 稳定可靠 日耗氮量小
13613908508 （熊经理）
18749181811 （武经理）
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细胞冻存是细胞生存的重要要领之一。利用冻存技能细胞置于-196~C液氮中低温生存，可以使细胞姑且摆脱成长状态而将其细胞特性生存起来，在须要的岁月苏醒细胞用于推行。并且适度的生存肯定量的细胞，可以防止因正在造就的细胞被污染或其他意外事故而使细胞丢种，起到了细胞保种的功用。除此之外，可以利用细胞冻存的情势购置、寄赠、互换和运输某些细胞。 细胞冻存时向造就基中加入掩护剂—浓度5%~15%的甘油或二甲基亚砜「DMSO」，可使溶液冰点低落，加之在迟缓冻结前提下，细胞内水分透出，镌汰了冰晶造成，从而禁止细胞损伤。尺度冷冻速率初阶为-1 到 -2℃/min，当温度低于-25℃时可加快，到-80℃之后可直接投入液氮内「-196℃」。
而今常用的掩护剂为二甲亚砜「DMSO」和甘油，它们对细胞**性，分子量小，熔解度大，易穿透细胞。
实行质料
仪器：液氮罐、冻存管「塑料螺口专用冻存管或安瓿瓶」、离心管、吸管、离心机等
试剂：0.25%胰酶、造就基、含掩护剂的造就基(即冻存液)
附：冻存液配制：造就基参预甘油或DSMO，使浓度达5-20%。掩护剂的种类和用量视细胞而分别。配好后4℃下生存。
实行步调
1.消化细胞，将细胞悬液网络至离心管中。
2.1000rpm离心10分钟，弃上清液。
3.沉淀加含掩护液的造就，计数，调解至5106/ml左右。
4.将悬液分至冻存管中，每管1ml。
5.将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口，封口肯定要严，否则复苏时易出现爆裂。
6.贴上标签，写明细胞种类，冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。
7.按下列次序降温：室温→4℃「20分钟」→冰箱冷冻室「30分钟」→低温冰箱「-30℃ 1小时」→气态氮「30分钟」→液氮。
细致：操纵时应警惕，省得液氮冻伤。液氮定期查抄，增加，不克不及挥发干净，一样通常三十立升的液氮能用1～1.5月。
